Влияние концентрации субстрата
Влияние рН
Для каждого фермента существует определенное значение рН, при котором его действие оптимально. Объясняется это зависимостью диссоциации ионогенных групп фермента или субстрата от реакции среды. Активность фермента зависит от определенного состояния (ионизированного или неионизированного) активного центра. На рисунке показаны два фермента с различными рН оптимумами.
Исследование влияния концентрации субстрата на активность фермента позволило во многом объяснить механизм действия фермента. При постоянной концентрации фермента начальная скорость реакции растет пропорционально увеличению концентрации субстрата (реакция первого порядка для низких концентраций субстрата). При высоких концентрациях скорость реакции достигает своего максимального значения (Vmax) и не зависит от концентрации субстрата (реакция нулевого порядка). Эта кривая описывается уравнением Михаэлиса–Ментен:
где Кm — константа Михаэлиса, численно равна той концентрации субстрата, при которой скорость реакции составляет половину от максимального значения.
С помощью Кm можно характеризовать сродство данного фермента к данному субстрату. Чем меньше Кm, тем больше сродство фермента к данному субстрату. Если Кm высока, то это означает, что сродство фермента к такому субстрату низкое и реакция при небольших концентрациях субстрата протекает неэффективно.