Бактериологическое исследование

Таблица 100 - Патогенные свойства хламидий

 

Вид хламидий Характер вызываемой патологии. Виды поражаемых животных
С. psittaci Аборты лошадей, коз, свиней, коров, овец, вульвовагиниты крупного рогатого скота. Энтериты, артриты телят. Энтериты, артриты телят. Энцефаломиелит крупного рогатого скота (спорадический). Пневмония свиней, коз, овец, крупного рогатого скота, кошек. Офтальмия крупного, мелкого рогатого скота, свиней. Пситтакоз (орнитоз) птиц с явлениями пневмонии. Аэросаккулит, перикардит, энцефалит, Конъюнктивит, энтерит. Пневмонии, аборты, конъюнктивиты человека.
С. trachomatis Поражения у человека органов зрения (трахома, конъюнктивит с включениями- паратрахома), репродуктивных органов (уретриты, сальпингиты, цервициты, эпидидимиты и др.).

Методы диагностики, позволяющие четко дифференцировать виды хла­мидий у животных, пока в полном объеме недоступны диагностическим лабораториям. Наиболее перспективным методом видовой идентификации хламидий представляется в этом плане полимеразная цепная реакция.

Лабораторная диагностика хламидиозов основана на детекции возбу­дителя в ПЦР, микроскопическом обнаружении клеток возбудителя в окрашенных мазках, идентификации в препаратах из исследуемого материа­ла при помощи серологических реакций (МФА, ELISA), выделении возбу­дителя путем заражения куриных эмбрионов и лабораторных животных с последующей идентификацией хламидий в органах и тканях при помощи вышеуказанных методов, а также на результатах исследований сывороток крови в серологических реакциях. Работы по диагностике антропозоонозных хламидиозов проводят только в лабораториях, которые имеют специ­альное разрешение режимной комиссии СЭС.

В случае абортов берут кусочки плаценты, абортированные плоды целиком или паренхиматозные органы, а также сычуг, образцы влагалищной слизи не позднее 1-2 дней после аборта. Образцы слизи отбирают ватно-марлевыми тампонами, которые потом помещают в пробирки с физиологическим раство­ром, содержащим 500 мкг/мл стрептомицина. При наличии конъюнктивитов соскобы с конъюнктивы берут затупленным скальпелем с предварительной ее обработкой 0,5% раствором дикаина, готовят мазки, фиксируют для ок­раски по Романовскому-Гимза или МФА и иммунопероксидазным методом. От павших или вынужденно убитых животных отбирают кусочки па­ренхиматозных органов, лимфатических узлов, образцы слизи носовой по­лости, трахеи, тонкого отдела кишечника, головного мозга и мозговых оболочек. При наличии у больных животных артритов направляют также синовиальную жидкость. У животных-производителей принудительно по­лучают пробы эякулята. Материал для исследования берут в первые два часа после гибели или аборта животного. Флаконы с материалом помеща­ют в термос со льдом и доставляют в лабораторию не позднее 24 часов после взятия. Оптимальным является помещение и доставка материала в термосе со льдом в специальной транспортной среде Spenser&Jonson (1983): сахароза — 74,6 г; КН2Р04 — 0,512 г; К2НР04 — 1,237 г; L-глутаминовая кислота — 0,721 г; феноловый красный — 0,015 г; ванкомицин — 100 мг; нистатин — 50 мг; стрептомицин —100 мг; гентамицин — 50 мг; дистилли­рованная вода — 1000 мл. При помощи КОН устанавливают рН 7,0 и сте­рилизуют фильтрацией. Среду разливают по 4 мл во флаконы и хранят при -20° С. В этой среде хламидий остаются жизнеспособными при комнатной температуре до
30 дней, при 4° С — до 34 дней. Для таких же целей мож­но использовать среду 199 с 5% фетальной сыворотки крови крупного рогатого скота или сахарозо-фосфатный буферный раствор с фетальной сывороткой (5-10%), с добавлением стрептомицина (100-200 мкг/мл), нистатина (25 мкг/мл), канамицина (100 мкг/мл). Возможна иная комби­нация антибиотиков: гентамицин — 20 мкг/мл, нистатин — 25 мкг/мл, ван комицин —100 мкг/мл. Реакцию сред устанавливают 7,0-7,1. Сахарозо-фосфатный буфер готовят по следующей прописи: 1-й раствор содержит 68,46 г сахарозы в 100 мл дистиллированной воды, 2-й раствор — 2,088 г безводной соли К2НР04 в 60 мл дистиллированной воды, 3-й раствор — 1,088 г безводной соли КН2Р04 в 40 мл дистиллированной воды. Все три раствора объединяют, доводят объем дистиллированной водой до 1000 мл, соляной кислотой доводят рН до 7,0-7,1, стерилизуют при 115° С в тече­ние 15 минут, хранят при 4° С.

Для серологических исследований берут с интервалом в две недели пар­ные пробы крови от клинически больных или подозрительных по заболева­нию животных.