Лабораторная диагностика микоплазмозов крупного рогатого скота, сопровождающихся поражением респираторного, генитального тракта и молочной железы
Серологическая диагностика
Биопроба
Таблица 94 - Биохимические свойства видов и серогрупп микоплазм, выделяемых от крупного рогатого скота
Вид или серогруппа | Аргинин | Глюкоза | Фосфатаза | Разжижение сыворотки | Редукция тетразолия натрия | Образование пленки и пятен | Гидролиз желатина | Гидролиз казеина | Гемадсорбирующие свойства колоний |
М. alcalescens | + | _ | + | - | -/- | - | - | н.д." | + |
М. arginini | + | - | - | - | -/+ | - | + | - | - |
М. bovigenitalium | - | - | + | - | -/+ | + | - | - | d |
М. bovirhinis | - | + | - | d | + /+ | - | - | + | d |
М. bovis | _ | - | + | - | + /+ | d | н. д. | - | + |
М. bovoculi | - | + | - | - | + /+ | + | - | н.д. | - |
М. canadense | + | - | Слабая реакция | - | -/+ | - | н. д. | н.д. | - |
М. dispar | - | + | - | - | + /+ | - | н.д. | н.д. | - |
М. mycoides subsp. mycoides | - | + | - | + /или слабая реакция | + /+ | + /или слабая реакция | + | ||
Группа 7 Leach | - | + | - | + | + /+ |
н. д. — нет данных, d — 11—89% штаммов положительные.
Проводят при возникновении болезни в благополучной зоне на телятах 6-8-месячного возраста путем введения экссудата от больных животных подкожно в область шеи или подгрудка, интратрахеально, интраплеврально или аналогичными способами бульонной культурой. Инкубационный период составляет 6-27 дней. В положительных случаях при подкожной инокуляции материала на месте инъекций развивается воспалительный отек, подъем температуры до 40-42°С. Летальный исход (не всегда) наступает через 12-15 суток.
Для выявления антител в сыворотке крови используют РСК, ELISA, РНГА, РА на стекле, латекс-агглютинацию, реакцию конглютинации, тесты инги-биции роста и метаболизма. Циркулирующий антиген может быть обнаружен в РДП. Основным методом диагностики является РСК, которую применяют для выявления в неблагополучном стаде животных с латентным течением болезни. Положительную реакцию дают животные, привитые против ПВЛ в течение 6-8 месяцев, а также инфицированные М. mycoides subsp. capri.
РСК ставят в объеме 1,25 мл. Сыворотку крови инактивируют при 56-58°С в течение 30 минут. Используют 3%-ную взвесь эритроцитов. Испытуемые сыворотки разводят 1:5. Первую фазу РСК проводят в водяной бане при 37-38°С в течение 20 минут, вторую — в течение 15 минут. Предварительный учет результатов РСК проводят сразу по завершении реакции, окончательный — через 12-18 часов. Задержку гемолиза на + + + +, + + +, оценивают как положительный, на + +, + — сомнительный результат. Сыворотки крови животных, которые дали сомнительную реакцию, через неделю иссл едуют повторно в разведениях 1:5 и 1:10.
У крупного рогатого скота пневмонию могут, кроме М. mycoides subsp. mycoides, вызывать М. bovis и М. dispar, у гнотобиотических животных изменения в легких обуславливают уреаплазмы, M.bovigenitalium. Инфекция М. bovis известна как пневмоартрит крупного рогатого скота, поскольку наряду с поражением легких сопровождается артритами и маститами.
Из генитального тракта крупного рогатого скота могут быть изолированы микоплазмы, уреаплазмы, ахолеплазмы. Ureaplasma diversum вызывает гранулярные вульвиты, эндометриты, аборты, сальпингиты, бесплодие, причем заболевание воспроизводится экспериментально
Mycoplasma bovigenitalium является причиной бесплодия, некротизирующего эндометрита, везикулита семенников. Причиной эндометритов, сальпингитов, оофоритов, абортов, везикулитов семенников может быть и М. bovis, хотя в основном этот вид вызывает пневмонии, артриты, маститы. Из генитального тракта часто выделяют М. canadense, A. laidlawii, M. bovirhinis, M. alkalencens, M. arginini, M. verecundum, M. alvi, A. axantum, A. oculi. При маститах крупного рогатого скота выделяются М. bovis, M. californicum, M. canadense. Лабораторная диагностика перечисленных микоплазмозов в основном базируется на результатах бактериологического исследования.