Лабораторная диагностика бортелиоза

Сывороточно-дрожжевой бульон. Готовят так же, как и сывороточно-дрожжевой агар, но на основе жид­кой питательной среды.

Сывороточно-дрожжевой агар. Содержит V-фактор. К расплавленному и остуженному до 45° С МПА Или агару Хоттингера добавляют 5-10% сыворотки крови лошади, круп­ного рогатого скота, овцы или кролика и такое же количество дрожжевого экстракта.

Приготовление дрожжевого экстракта. Пекарские прессованные дрожжи (250 г) суспендируют до образования гомогенной взвеси в 1000 мл дистиллированной воды, кипятят на огне в течение 4-5 минут. Микробную массу осаждают центрифугированием, надосадочную жид­кость пропускают через стерилизующие пластины фильтра Зейтца. Сте­рильный дрожжевой экстракт хранят при 4-5° С и используют в тече­ние 8-10 суток.

 

Питательные среды с добавлением чистых препаратов V- и
Х-ростовых факторов.В основную питательную среду (плотную, жидкую) вносят раствор NAD или протогема (Х-фактор) или эти оба фактора, в зависимости от ростовых потребностей микроорганизма. При этом необходимо учитывать, что NAD термолабилен, его необходимо стерилизовать фильтрацией и добавлять в охлажденную до 45°С среду.

Приготовление раствора NAD. Один грамм препарата растворяют в 100 мл дистиллированной воды, стерилизуют фильтрацией, добавляют в базовую питательную среду до конечной концентрации 1 мг/мл.

Приготовление раствора протогема. Вещество в количестве 0,1 г ра­створяют в 100 мл 1%-ного раствора Na₂C0₃, стерилизуют автоклавиро-ванием. Растворы выдерживают длительное хранение при 4-6° С.

 

Селективная среда Controni с соавт. (1972). На чашки Петри с кровяным агаром, содержащим 5% крови бара­на, засевают исследуемый материал. Затем кладут диск фильтроваль­ной бумаги с раствором сапонина (5%) и бацитрацина (2 ЕД). Сапонин разрушает эритроциты, вокруг диска образуется зона гемолиза. Из раз­рушившихся эритроцитов освобождаются Х- и V-факторы, которые диффундируют в толщу питательной среды и обеспечивают рост зави­симых бактерий.

 

Селективная среда Chapin с соавт. (1983).К расплавленному «шоколадному» агару добавляют ванкомицин (5 мкг/ мл), бацитрацин (300 мкг/мл) и клиндамицин (1 мкг/мл).

Бордетеллы представляют собой аэробные, мелкие грамотрицательные коккобактерии, являются паразитами млекопитающих, обитают среди ресни­чек эпителия дыхательного тракта. Относятся к роду Bordetella, который включает семь видов: В. pertussis, В. parapertussis, B.bronchiseptica, В. avium, В. hinzii, В. holmseii, В. trematum.

В. bronchiseptica является этиологическим агентом бронхопневмоний поросят, атрофического ринита свиней; у собак вызывает инфекционный трахеобронхит, нередко в сочетании с вирусными инфекциями; у кроли­ков — поражения верхних отделов респираторного тракта, бронхопневмо­нии или септицемии; В. avium, которую ранее именовали как В. bronchiseptica — подобные бактерии, вызывает ринотрахеит и синусит у индюшат, цыплят и уток. В. pertussis — патоген человека и других приматов; В. parapertussis вы­зывает мягкие формы бордетеллеза человека, а также может быть причи­ной пневмоний ягнят.

Лабораторная диагностика основана на результатах бактериологичес­кого исследования.