Дифференциация некоторых родов энтеробактерий
Плотных дифференциальных средах
Таблица 16 – Характеристика колоний энтеробактерий на
Выделения энтеробактерий
Таблица 15 - Питательные среды, рекомендуемые для первичного
Исследуемый материал | Энтеробактерии, которые могут содержаться в исследуемом материале | Плотные (селективные) среды | Жидкие (среды накопления) | ||||||||||||||
Плоскирева | Висмут-сульфит агар | Левина | Эндо | Мак-Копки | Минка | Магниевая | Селенитовая | Мюллера или Кауфмана | Киллиана | Рапопорт | Глюкозный бульон | Буферная (Юшенко) | К-1 | П-1 | ЭТ-1 | ||
Фекалии, отрезок тонкого кишечника | Salmonella Escherichia Klebsiella Yersinia Proteus Serratia Morganella | + ++ + ++ | + | ++++ ++ | + + + + + + | + + + + + + | + | + | + | + | + | + | + | + | + | ||
Кровь | Salmonella Escherichia Klebsiella Yersinia | ++++ | + + + + | + | + | + | + | + | |||||||||
Моча | Salmonella Escherichia Klebsiella Proteus Yersinia | ++++ | + | +++ + | + + + + | + + + + | + | + | + | + | + | + | + | + | + | ||
Паренхиматозные органы, трупы, плоды | Salmonella Escherichia Klebsiella Proteus Yersinia | ++++ | + | ++ + + | + + + + | + + + + | + | + | + | + | + | + | + | + | + | ||
Легкие | Salmoella Escherichia | + + | + | + | + | + | + | + | + | + | + | ||||||
Молоко | Salmonella Escherichia Klebsiella Serratia | ++++ | + | ++++ | + + + + | ++++ | + | + | + | + | + | + |
Среда | Дифференцирующие компоненты | Индикатор | Цвет колоний в зависимости от | |||
ферментации углеводов | образование сероводорода | |||||
+ | - | + | - | |||
Плоскирева | Лактоза | Нейтральный красный | Розовый, красный | Бесцветный | ||
Висмут-сульфат | Глюкоза, сульфит висмута | Сульфат железа | Черный, зеленый | Бесцветный | ||
Левина | Лактоза | Эозин, метиленовый синий | Темно-синий, черный с металлическим блеском | Бесцветный | ||
Эндо | Лактоза | Основной фуксин | Красный с металлическим блеском | Бесцветный | ||
Мак-конки | Лактоза | Нейтральный красный | Розовый, красный | Бесцветный |
При дифференциации родов энтеробактерий ключевое значение имеет изучение биохимических и физиологических свойств, являющихся генетически более стабильными (табл. 15). Кроме сред Гисса с соответствующими индикаторами и реактивами, для идентификации энтеробактерий могут быть использованы различные диагностические системы, позволяющие сократить и упростить исследования. Так, системы индикаторные бумажные (СИБ), представляющие собой диски или полоски хроматографической бумаги с необходимыми субстратами и индикаторами, а также диски из фотопленки с желатином, выпускаются в виде двух наборов (изготовитель — предприятие по производству бактерийных препаратов Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии). Набор «А» (малый) предназначен для межродовой дифференциации энтеробактерий по 9 основным биохимическим свойствам: утилизации цитрата натрия, малоната натрия, ферментации лактозы, наличию (β-галактозидазы, фенилаланиндезаминазы, уреазы, лизиндекарбоксилазы, образование индола, сероводорода (табл. 16).
Системы мультимикротестов для идентификации микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae, выпускаемые НПО «Алерген» (г. Ставрополь), включают два набора. Набор ММТ Е1 позволяет определить 12 ключевых ферментативных свойств энтеробактерий: образование сероводорода, индола, наличие лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы, уреазы, фенилаланиндезаминазы, утилизацию цитрата натрия, малоната натрия, маннита, сахарозы, лактозы, сорбита. Набор ММТ Е2 позволяет определить 12 дополнительных биохимических свойств, которые в сочетании с 12 ключевыми свойствами служат для видовой идентификации энтеробактерий: наличие аргининдегидролазы, бетта-галактозидазы, нитратредуктазы, утилизация инозита, дульцита, арабинозы, рамнозы, мальтозы, адонита, раффинозы, салицина, глюкозы.
После изучения биохимических и физиологических свойств культур заключительным этапом анализа является серологическая идентификация. Антигены и антигенная структура сальмонелл, эшерихий, отчасти протея и клебсиелл изучены достаточно глубоко. Менее известна антигенная структура иерсиний.
Из числа известных антигенов энтеробактерий значение для серологической идентификации имеют три: О-, К- и Н-антигены.
О-антиген (соматический) расположен в клеточной стенке бактерий. Он представляет собой липополисахаридо-протеиновый комплекс. Липид связан с токсигенностью, протеин обусловливает иммуногенность, полисахарид является компонентом, определяющим антигенную специфичность.