Устройство и принцип действия фотонефелометра.

РИСУНОК

1-лампа, 2-диафрагма,3-светофильтр,4-кювета,5-фотоэл-т,6-гидроамперметр

Для сохранения постоянства интенсивности света лампу соединяют с стабилизатором напряжения. Турбодиметрия аналогична во многом Фотонефелометрическим методам анализа, где также измеряют интенсивность света, прошедшего через кювету с анализ. р-ром(р-р мутный). Для Фототурбодиметрии исп-ют ФЭКи. Если количествен. опр-е в-ва м.б. осущ-но Фотонефелометрич. методом, то опр-е возможно и в Фототурбодиметрич. методом и наоборот. Различие состоит в том, что с повышением конц-и определяемого компонента интенсивность рассеивания света увелич., и инт. света, прошедшего через кювету снижается.

 

34. Фотофлуориметрический анализ. Схема фотофлуориметра.

Явление флуористенции (люменистенции) основано на спос-сти атомов или мол-л в-ва отдавать поглощённую энергию в виде «холодного» светового излучения. В-во, поглощая свет, излучает световую энергию. Энергия квантов света, выделяющ. при флуорист-и, всегда меньше энергии квантов, поглощённого(возбуждающего) света.Если возбуждать флуорист-ю УФ-лучами, то излуч-ся видимый свет. Длина волны излучаемого света больше длины волны возбуж-го света, а частоты наоборот.

Правило Стокса: спектр флуорист-и смещён в сторону более длинных волн по сравнению со спектром поглощения. Отношение числа испускаемых при флуорист-и квантов N_ф к числу поглощённых квантов N_п наз-ся квантовым выходом Q: Q= N_ф / N_п

Правило Вавилова: квантовый выход не зависит от длины волны возбуждающ. флуорист. света.

Для решения аналит. задач чаще исп-ся излучение, возникающее под действием лучистой энергии и исчезающее прекращением этого действия - флуористенция

Фотофлуориметрический метод анализа основан на измерении интенсивности флуористенции . При флуористенции, вызван. микроколич. в-ва, наблюдается прямая зависимость между интенсивностью свечения и конц-ей р-ра. При высокой конц-ии р-ра ( 10^-4 г/мл) интен-сть флуорист-и постепенно снижается до нуля (концентрационное тушение флуористенции). С повышение темпер-ры интен-сть флуорист-и также уменьшается (температурное тушение флуорист-ции).

Интенсивность флуорист. измеряют на фотофлуориметре.

 

1.Источник УФ-излучения 2.Первичный светофильтр 3.Кювета 4.Вторичный светофильтр 5.Фотоэлемент 6.Электронный усилитель 7.Микроамперметр

Источник УФ-излучения – ртутно-кварцевая лампа, кот-я излучает и видимые, и тепловые лучи. Для поглощения видимого света – светофильтры 2 и 4. Первичный светофильтр 2 поглощает большую часть видимого света, но пропускает УФ-лучи ( такие светофильтры наз-ся светофильтр УФС). УФ-лучи от источника излучения 1 пройдя через светофильтр 2 попадает в кювету с анализ-м в-вом 3. Возбуждаемое в кювете флуорист. излучение проходит через 4, задерживающ. лучи длиной волны больше или равно 650 нм. Поступает на 5. Для регистрации фототока прибор оснащён элетронным усилителем 6 и микроамперметром 7. В кювету помещают анализ. р-р, отмечают показания прибора. Заполняют кювету станд-м р-ром, не содерж. определ. в-ва. Во все р-ры предварительно добавляют необходимые реактивы. Концентрацию анализ-го в-ва вычисляют по ф-ле:

С_х = (а₁-а₂)*с / а₃-а_{2 ,} мкг/мл

а_1, а_3, а₂ – показания фотофлуорим. при заполнении кюветы анализ. контрольным и станд-м р-ром соответственно; с – конц-я станд. р-ра

2 группы фотофлуометр. определений:

1. По собственной флуористенции в-ва(рибофлавин, тиамин)

2. На основе р-ции в рез-те кот-х из нефлуорист. в-ва образ-ся хлористирующий продукт ( опред-е цинка по р-ции с 8-гидроксихинолином)

Практич. опред-е компонента, образующего флуорист. соед-ия в р-ре, проводят по след. схеме:

1)Растворение пробы и перевод определяемого компонента в люменист. соед-е. 2) облучение пробыисточником УФ-излуч-я 3) опред-е интен-сти люменистенции 4) опред-ие градуировочной хар-ки и расчёт содерж-я определ. компонента