Сущность спектрофотометрии. Схема спектрофотометра.
Сп/ф-я основана на тех же законах светопоглощения, что и фотоэлектроколориметрия (кот основана на измерении интенсивности света видимой части спектра).
Схема спектрофотометра:
1-источник света, 2- зеркало-конденсор, 3- плоское зеркало, 4- кварцевая пластина, 5- монохроматор, 6- коллиматор, 7- диспергирующая призма, 8- фильтр, 9- кювета с анализ-м вещ-вом, 10- линза, 11- фотоэлемент.
Наиболее правильн рез-ты получают, когда оптич плотн-ть ≈ 0,4. Если она > 0,8, то применяют кюветы с меньшим l. При оптич плотн-ти ≤ 0,1 надо применять кюветы с большим l.
Задачи, решаемые фотометрическими методами.
1) Определения, основанные на собственном светопоглощении в-в (опред-е кофеина в чае).
2) Определения, связ-е с образов-м интенсивно окраш-х прод-в при добавлении бесцветного или слабоокрашенного реактива к бесцветному р-ру определяемого в-ва (опред-е белков по реакции Несслера)
3) Определения, основанные на измерении интенсивности окраски избытка окрашенного реактива (опред-е сахаров по избытку дихромата калия)