Работа 11. Качественные реакции на обнаружение витамина Е
Работа 9. Определение числа омыления
Числом омыления называется количество миллиграммов КОН, необходимое для нейтрализации как свободных, так и связанных жирных кислот, содержащихся в 1 г масла.
Содержание свободных жирных кислот в масле характеризуется кислотным числом, а содержание связанных в виде эфиров кислот – эфирным числом, то есть количеством миллиграммов КОН, необходимого для нейтрализации освобождающихся при омылении эфирных связей жирных кислот а 1 г масла.
Экспериментально эфирное число определяется по разности между числом омыления и кислотным числом.
Реактивы: 0,5 н спиртовой раствор КОН, 0,5 н HCl, фенолфталеин.
Оборудование: весы, баня водяная, колбы конические, пробирки с обратным холодильником, пипетки, бюретка.
ХОД РАБОТЫ. В пробирку вносят 0,5 г жира, а в другую – 0,5 мл воды затем в обе пробирки добавляют по 5 мл 0,5 н спиртового раствора КОН. Пробирки закрывают пробками с обратными воздушными холодильниками и нагревают на кипящей водяной бане 30 мин при периодическом встряхивании. По окончании омыления содержимое пробирок выливают в колбы, добавляют по 5 мл воды, 3-4 капли фенолфталеина и титруют 0,5 н раствором HCl до исчезновения розовой окраски (определяют количество несвязавшейся щелочи). Исходя из того, что 1 мл 0,5 н раствора КОН соответствует 28 мг его, расчет числа омыления ведут по формуле:
Число омыления = (V1-V2) · 28 / a,
где V1 – количество (в мл) 0,5 н. раствора HCl, затраченное на титрование контроля (колба с водой), V2 – количество (в мл) 0,5 н раствора НСl, затраченное на титрование опыта (колба с жиром), а – навеска жира (в г).
Работа 10. Обнаружение желчных кислот в моче (проба Петенкофера)
Проба основана на образовании окрашенного продукта при взаимодействии желчных кислот и оксиметилфурфурола, который образуется из сахарозы при действии концентрированной серной кислоты.
Исследуемый материал: моча.
Реактивы: концентрированная серная кислота, 5%-ный раствор сахарозы.
Оборудование: пробирки, пипетки.
ХОД РАБОТЫ. В пробирку налить 5 мл мочи, добавить 10 капель раствора сахарозы и осторожно, по стенке пробирки, добавить 10 капель концентрированной серной кислоты. Не взбалтывать! Оставить на 10-15 мин пробирку в штативе.
При наличии в моче желчных кислот на границе жидкостей образуется красно-фиолетовое кольцо.
Взаимодействие α-токоферола с концентрированной азотной кислотой приводит к окрашиванию реакционной смеси в красный цвет. Это обусловлено тем, что продукт окисления α-токоферол имеет хиноидную структуру. При взаимодействии с хлорным железом (III) α-токоферол окисляется до α-токоферилхинона – соединения, окрашенного в красный цвет.
Реактивы: спиртовый раствор α-токоферола, концентрированная HNO3, 1%-ный раствор FeCl3.
Оборудование: пробирки, пипетки.
ХОД РАБОТЫ. Реакция с азотной кислотой. В сухую пробирку вносят 5 капель спиртового раствора витамина Е и добавляют 1 мл концентрированной азотной кислоты. Пробирку интенсивно встряхивают и наблюдают постепенное появление красного окрашивания.
Реакция с хлорным железом. В сухую пробирку вносят 0,5 мл спиртового раствора витамина Е, затем 0,5 мл раствора хлорного железа и тщательно перемешивают содержимое пробирки. Наблюдают появление красного окрашивания.