Работа 7. Выделение гликогена из печени
Работа 6. Кислотный гидролиз крахмала
Полисахариды
Работа 5. Количественное определение редуцирующих сахаров. Титрование раствором Фелинга
Метод основывается на принципе пробы Троммера. Благодаря добавлению сегнетовой соли обеспечивается удержание в растворе гидроокиси меди в виде комплексного соединения. Вследствие этого раствор становится более удобным для количественного определения. Употребляют два раствора, которые должны храниться отдельно.
Реактивы: Раствор 1. Растворяют 34,639 г чистой кристаллической сернокислой меди в 500 мл воды. Раствор 2. Растворяют 173 г совершенно чистой сегнетовой соли в небольшом количестве воды, приливают 100 мл 50% -ный натронной щелочи и доливают водой до 500 мл. Перед употреблением смешивают равные объемы 1 и 2. 20 мл этого раствора соответствуют 0,1 г глюкозы.
Оборудование: колбочки, кипящая водяная баня, бюретка.
ХОД РАБОТЫ. Точно отмеривают 20 мл фелинговой жидкости в колбу и разбавляют ее 80 мл воды. Этот раствор нагревают до начинающегося кипения и приливают сюда же из бюретки некоторое количество исследуемого раствора сахара. Кипятят несколько секунд и, если жидкость при этом остается синей, добавляют некоторое количество испытуемого раствора. Эти операции продолжают до тех пор, пока жидкость над образовавшимся красным осадком Cu2O не станет бесцветной (но не желтой). Затраченное для достижения этого момента количество испытуемого раствора содержит 0,1 г глюкозы. Метод является быстрым в выполнении, но не очень точным.
Реактивы: 0,1%-ный раствор крахмала, 2 н раствор Н2SO 4, раствор Люголя, 2 н раствор CuSO4, 2 н раствор NaOH.
Оборудование: колбочка, пробирки, пипетки, спиртовка.
ХОД РАБОТЫ. В колбочку помещают 5 мл 0,1%-ного раствора крахмала 3 мл 2 н раствора серной кислоты. Нагреть на спиртовке в течение 5 мин, отбирая пипеткой каждую мин по 0,5 мл гидролизата и добавляя в них по 1 капле раствора Люголя.
Обратить внимание на изменение окраски гидролизата с йодом в ходе гидролиза. С оставшимся гидролизатом проделать реакцию Троммера. По результатам реакции сделать вывод о строении крахмала.
Исследуемый материал: печень крысы.
Реактивы: 5%-ный раствор ТХУ, дистиллированная вода, раствор Люголя.
Оборудование: ступка, пестик, фильтры, пробирки, пипетки.
ХОД РАБОТЫ. 0,5 г печени крысы помещают в ступку, добавляют 3 мл 5%-ного раствора ТХУ и растирают пестиком 10 мин. Затем к экстракту добавляют 5 мл дистиллированной воды, суспензию перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр, смоченный водой. С фильтратом проделывают реакцию с раствором Люголя. Сделать соответствующий вывод.