Розв’язання.

Коінтегративний вектор містить сайт ініціації реплікації та селективний маркер (наприклад, Amp) для E.coli, праву фланкуючу послідовність Т-ДНК Ті-плазміди, рослинний селективний маркер (наприклад, ген стійкості до канаміцину - Kan) , ген нітрилази під контролем сильного рослинного промотору (наприклад вірусу кольорової мозаїки), після якого обов’язково знаходяться сигнали термінації та поліаденілірування . Цей вектор також обов’язково містить послідовність. гомологічну ділянці допоміжної неонкогенної Ті-плазміди для забезпечення їх інтеграції. Допоміжна плазміда містить сайт ініціації реплікації в A.tumefaciens та гени vir а також ліву фланкуючу послідовність Т-ДНК. Коінтегративна плазміда трансформує клітини E.coli, після чого переноситься шляхом кон’югації в реціпієнтний штам A.tumefaciens. Після рекомбінації ген токсину входить до складу хромосоми тютюну.

 

8. Вам необхідно створити трансгенну рослину томату, стійку до шкідливих комах, використовуючи бінарний вектор на основі Ті-плазміди. Відомо, що з одного з видів бацил виділили ген природного токсину. Зобразіть генетичну карту цього вектору.

 

Розв’язання.

Бінарний вектор на основі Ті-плазміди містить сайт ініціації реплікації та селективний маркер (наприклад, Amp) для E.coli, між лівою та правою фланкуючими послідовностями знаходяться : рослинний селективний маркер (наприклад, неоміцинфосфотрансфераза) та ген природного токсину під контролем сильного рослинного промотору (наприклад вірусу кольорової мозаїки), після якого обов’язково знаходяться рослинні сигнальні послідовності термінації та поліаденілірування. Цей вектор вводять в штам A.tumefaciens, яким заражують рослини томату.

 

8. Пізню ділянку вірусу SV40 замінили на ген α-глобіну миші і одержали змішану популяцію вірусів, в якій були присутні рекомбінантні молекули ДНК вірусу SV40. Які ще вірусні частинки присутні в цій популяції?