Розв’язання.

Інтегруючий вектор для одержання експресії в клітинах P.pastoris обов’язково містить: сайт ініціації реплікації та селективний маркер (наприклад, Amp) для E.coli; послідовності, комплементарні певним хромосомним послідовностям P.pastoris (PK), між якими розміщується чужорідний ген, експресія якого очікується . Чужорідний ген знаходиться за промотором дріжджового гену (Р) (наприклад, алкогольоксидази) безпосередньо перед сигнальними послідовностями термінації–поліаденілірування цього гену (Pt). Інтегрована ділянка містить селективний дріжджовий маркер (Н), який робить можливим ріст клітин на середовищі без гістаміну. Операції клонування проводяться в E.coli.

Примітка. Вектор , що використовується у виробництві містить також ділянку ori для забезпечення реплікації в P.pastoris .

 

6. Вам необхідно створити трансгенну рослину тютюну, стійку до дії певного гербіциду, застосовуючи коінтегративний вектор на основі Ті-плазміди. Відомо, що стійкість рослини до цього гербіциду забезпечується трансформацією рослини тютюну бактеріальним геном нітрилази, яка нейтралізує дію гербіциду.