ВАРІАНТ 2

1. Принципи побудови карт рестрикції. Аналіз фрагментів рестрикції.

2. Методи виділення ДНК, її синтезу та рестрикції.

3. ДНК-зонди. Клонування. Векторні системи. Одержання зондів та їх мічення.

4. Виділення та очищення плазмідної ДНК. Основні методи виділення плазмід. Методи мічення плазмід: радіоактивне, ферментативне, хімічне, їх характеристика.

5. Мічення дволанцюгової ДНК. Метод науклеотидного заміщення (ник-трансляція). Метод розсіяної затравки. Одержання зондів за допомогою полімеразної ланцюгової реакції.

6. Принцип методу гель-електрофорезу нуклеїнових кислот. Характеристика поліакриламідного та агарозного гелів. Апарати для електрофорезу в вертикальних та горизонтальних пластинах гелю.

7. Оперон містить 10 800 нуклеотидів. У ньому закодовано три поліпептидні ланцюги, кожен з яких складається з 360 амінокислотних залишків. На інтронні ділянки структурних генів припадає 3 600 нуклеотидів. Визначити лінійні розміри та молекулярну масу гена-оператора.

8. Оперон містить 9300 нуклеотидів. У ньому закодовано три поліпептидні ланцюги, кожен з яких складається з 250 амінокислотних залишків. Молекулярна маса інтронних фрагментів така ж сама, як і екзонних. Визначити лінійні розміри гена-оператора.

 

ВАРІАНТ 3

1. Синтез РНК-зондів методом транскрипції іn vitro.

2. Вибір вектора. Одержання ДНК-матриці. Транскрипція. Переваги РНК-зондів та можливості їх використання.

3. Одержання олігонуклеотидних зондів.Типи олігонуклеотидних зондів та їх використання.

4.Блот-гібридизація ДНК. Виготовлення ДНК-блотів за Саузерном та дот-блотів. Використання блот-гібридизації для вивчення хвороб людини.

5. Блот-гібридизація РНК. Виготовлення Нозерн-блотів та РНК-дот-блотів.Виявлення гібридизованих та ізотопно мічених зондів. Виявлення неізотопно мічених зондів.

6. Апарати для електрофорезу в вертикальних та горизонтальних пластинах гелю. Приготування препаратів нуклеїнових кислот для електрофорезу.

7. Молекула проі-РНК складається з 900 нуклеотидів, причому на інтронні ділянки припадає 300 нуклеотидів. Яку кількість амінокислотних залишків містить поліпептид, закодований відповідною і-РНК? Визначте довжину і масу молекули і-РНК, яка братиме участь у трансляції.

8. У молекулі проі-РНК на інтронні ділянки припадає 800 нуклеотидів. Визначити молекулярну масу і довжину структурного гена, якщо в ньому закодовано поліпептид, маса якого становить 20 000 а.о.м.