Структурно-функціональна организація геномів вірусів, прокаріотів та еукаріотів

Генетичні та фізичні карти геному.

Особливості структурно-функціональної організації геномів вірусів.

Будова та функціонування геномів прокаріотів. Модель Жакоба-Моно. Регуляція транскрипції. Аттенуація. Бактеріальний промотор.

Молекулярна організація генів еукаріотів. Особливості транскрипції генів еукаріотів.

Плазміди та мобільні генетичні елементи бактерій. Будова IS-елементів та транспозонів (Tn3, Tn5, Tn9) бактерій. Роль мобільних генетичних елементів.

Ферменти, що використовуються в генній інженерії

Ферменти рестрикції і модифікації. Побудова рестрикційних карт.

Характеристика ферментів,що використовуються при конструюванні рекомбінантних ДНК: ферменти, за допомогою яких одержують фрагменти ДНК; ферменти, що синтезують ДНК на матриці ДНК або РНК; ферменти, що з’єднуютьфрагменти ДНК; ферменти, які дозволяють здійснити зміну структури кінців фрагментів ДНК.

Методи конструювання гібридних молекул ДНК

Основні етапи створення трансгенних організмів.

Етапи клонування ДНК. Рекомбінантні ДНК.

Векторні молекули ДНК.Поняття про вектор. Типи векторів, їх конструювання.

Вектор та його ємкість. Полілінкер.

Функціональна класифікація векторів: экспресуючі вектори, човникові (бінарні) вектори.

Властивості бактеріальних плазмід, що використовуються при конструюванні векторних молекул.

Вектори для прямого клонування продуктів ПЛР.

Вектори на основі хромосоми фага λ.

Інсерційні вектори та вектори із заміщенням.

Способи упаковки рекомбінантної ДНК у фагові частки. Косміди та фазміди. Принципи конструювання штучних хромосом. Ретровірусні та аденовірусні вектори, вектори на основі хромосом аденоасоційованих вірусів.

Принципи адресної доставки трансгенів. Керування експресією трансгенів у клітинах-мишенях.

Фактори, що впливають на ефективність експресії рекомбінантних генів у

бактеріальних клітинах.

Очистка рекомбінантних білків з використанням амінокислотних послідовностей.