Лабораторного заняття № 8 з дисципліни «Генетична інженерія»

1. Тема заняття: «Створення гібридних інтерферонів»

2. Мета проведення заняття: вивчити методи створення гібридних інтерферонів.

 

2.1 Після виконаної роботи студент повинен

знати: Що таке сайт рестрикції, ферменти генної інженерії, які використовують для створення гібридних генів, використання ревертаз, способи отримання інсуліну.

вміти:створювати рекомбінантні ДНК за допомогою рестриктаз, розрізняти активні центри гормону соматотропну.

 

3.План семінарського заняття:

У 1957 р. в Національному інституті медичних досліджень Лондону Ісаакс і Ліндерманн виявили, що клітини тварин, які підлягають дії вірусу, виділяють у середовище фактор, який надає клітинам, що не оброблені вірусом, стійкість до вірусної інфекції. Фактор запобігав (інтерферировав) розмноженню вірусів у клітині і тому отримав назву – інтерферон. Пізніше виявилось, що існує три групи інтерферонів: α-інтерферони (ІФα), що створюються при дії вірусів на лейкоцити, β-інтерферони (ІФβ), що творюються при дії вірусів на фібробласти, γ-інтерферони (ІФγ), які також мають назву імунні і створюються Т-лімфоцитами у відповідь на діюантигенів, або антигенних детермінант.

ІФα кодуються родиною генів, що складається приблизно з 20 неалельних генів. Підтипи ІФα виявляють різну специфічність і мають власні особливості. Поєднати ці особливості в одній молекулі ІФα можливо за рахунок створення комбінованого гібридного гену. Порівняння послідовностей кДНК ІФα2 і ІФα3 показало, що вони містять однакові сайти рестрикції RЕ1, RЕ2, RЕ3 в позиціях 60, 92 і 150. Після розщеплення і наступного лігірування фрагментів було отримано декілька гібридних генів.

Завдання

1. Заповніть пропуски у наступних твердженнях:

 А. Для створення лікарських препаратів на підставі білків частіше використовують ________ ДНК (______).

 Б. ______ отримують на підставі зрілої _________ мРНК, яка відрізняється від _______ РНК, тим, що не містить __________.

 В. Інший підхід полягає у створенні антитіл до очищеного білку і використовують для ______бібліотек, в яких здійснюється _________ певних генів.

 Г. Порівняння послідовностей ______ ІФα1та ІФα2 виявило, що вони містять однакові ________ __________ в певних позиціях.