Гемолиз крови
Цель работы:ознакомится с различными видами гемолиза и механизмами, вызывающими его.
Для работы необходимы:штативы с пробирками, набор градуированных пипеток на 1-3 мл; растворы: 0,9% хлористого натрия, 0,9 % хлористого калия, 0,35 и 0,1% хлористого натрия, 10% соляной кислоты; аммиак, хлороформ, эфир, дистиллированная вода, цитратная кровь.
№1. Осмотический гемолиз.
Ход работы.Приготовить 5 чистых пробирок и в каждую из них налить 2-3 мл одного из следующих растворов: 0,1, 0,35, 0,9 % хлористого натрия, 0,9% хлористого калия, дистиллированной воды. В каждую пробирку добавить по 2-3 капли крови, хорошо перемешать. Отметить полученные результаты. Выводы.
№ 2. Действие кислот и щелочей.
Ход работы.Приготовить 3 пробирки, в каждую из них налить 3 мл 0,9% раствора поваренной соли и прибавить по 2-3 капли крови. После этого в одну из пробирок добавить 1 мл разведенной соляной кислоты, во вторую – 1 мл раствора аммиака, а третья – остается контрольной. Сравнить состояние крови в пробирках. Сделать результаты. Выводы.
№ 3. Действие эфира и хлороформа.
Ход работы.Приготовить 3 пробирки, в каждую из них налить по 5 мл 0,9% раствора поваренной соли и прибавить по 2-3 капли крови. Затем в одну пробирку долить 1 мл хлороформа, в другую – 1 мл серного эфира, третья – остается контрольной. Растворы в пробирках хорошо перемешать. Отметить результаты. Выводы.
Опыт № 10
Определение осмотической устойчивости эритроцитов
Цель работы:определить максимальную и минимальную осмотическую устойчивость эритроцитов.
Для работы необходимы:штатив с пробирками, 1% раствор поваренной соли, дистиллированная вода, цитратная кровь, мерные градуированные пипетки или бюретки.
Ход работы. Применяется метод Лимберкка. В 17 пронумерованных пробирках приготовляют в убывающей концентрациях растворы поваренной соли по таблице:
№ | |||||||||||||||||
Кол-во 1% р-ра пов.сол. | 5,5 | 5,2 | 4,8 | 4,5 | 4,2 | 4,0 | 3,8 | 3,5 | 3,2 | 2,8 | 2,0 | ||||||
Кол-во дис. вод. в мл | 4,5 | 4,8 | 5,2 | 5,5 | 5,8 | 6,0 | 6,2 | 6,5 | 6,8 | 7,2 | 8,0 | ||||||
Получ. р-р пов. сол. в % | 0,9 | 0,8 | 0,7 | 0,6 | 0,56 | 0,52 | 0,48 | 0,45 | 0,42 | 0,4 | 0,38 | 0,35 | 0,32 | 0,28 | 0,2 |
В каждую пробирку пипеткой вводится по 2-3 капли исследуемой крови, содержимое пробирок тщательно осторожным встряхиванием перемешивается и через 1-2 часа при комнатной температуре в проходящем свете отмечаются первоначальное просветление раствора и полное просветление раствора. Сделать выводы.
Опыт № 11