Механизмы действия преаналитических факторов на результаты теста СОЭ.

Сам процесс оседания эритроцитов в вертикально стоящем узком сосуде предполагает достаточно сложный механизм СОЭ, отличный от физиологических условий. По мере оседания клеток и их аггрегатов в замкнутой системе образуется также обратный ток плазмы крови вверх. Во время измерения СОЭ изменение скорости оседания не является линейным и график представляет собой варианты сигмовидной кривой (рис.3)

 

Условно можно выделить три фазы 60 мин. цикла измерения СОЭ, имеющих разную скорость:

 

I -Аггрегационная (гемагглютинационная) фаза и оседание отдельных клеток с уменьшением расстояния между ними (условно 0-10 мин.), во время которой в норме эритроциты ассоциируются в физиологические агрегаты (1) типа монетных столбиков. Разные преаналитические и аналитические факторы будут иметь преимущественное влияние на разные фазы теста СОЭ.

 

Скорость на этой фазе увеличена за счет:

- Агрегации: При патологических изменениях в крови уже могут присутствовать эритроцитарные агрегаты, связанные с изменением заряда и поверхностных свойств клеток и образованием связей через положительно заряженные белки агглютинины (альфа-глобулин, белки острой фазы, фибриноген и др.).

- Свойств эритроцитов: Патология эритроцитов, например эхиноцитоз, микроцитоз и анизоцитоз, изменения в клетках при хронической гипоксии и других процессах, снижение заряда эритроцитов, в том числе при действии преаналитических факторов (например, при снижении Са++ в пробе при сочетанном действии ЭДТУК и цитрата, действие некоторых лекарственных агентов).

- Свойств крови: При низкой плотности плазмы крови в результате гипопротеинемии и разведения образца, и гематокритном числе ниже 30 %, присутствие микроагрегатов, избыток фибриногена в результате некоторых патологических процессов, лейкоциоз, связанный с онкологическими заболеваниями.

 

Скорость на этой стадии уменьшена за счет :

-Свойств крови - При гемолизе в пробе, избытке хиломикронов и ЛПНП,

 

-Свойств эритроцитов: Патология эритроцитов, например мактоцитоз, осмотическое и субгемолитическое разбухание клеток, оксигенированные эритроциты также меньше образуют агрегаты и более медленно оседают.

 

II. Фаза увеличения числа и плотности эритроцитарных аггрегатов, приводящая с ускорению процессов оседания (от 10 до 40 мин.)

Все описанные для первой стадии механизмы, связанные со свойствами пробы крови, также имеют влияние и на этой стадии. Особо следует отметить , что свойства патологических аггрегатов (размер, подвижность, плотность, заряд, включение в них белков будут иметь большое значение для этой стадии). Вместо ускорения скорость оседания может быть к определенному моменту существенно снизится, если агрегаты образуют крупные конгломераты, перекрывающий движение восходящих потоков плазмы и нисходящих потоков клеток с системе.

 

В этих условиях важными факторами становятся особенностями выполнения теста и свойства тестирующей системы. Чем уже просвет СОЭ капилляра, тем большее значения приобретает поверхностное связывание аггрегатов со стенкой, приводящее к замедлению процессов оседания. Заряд, материал и свойства поверхности капилляра, а также попадание посторонних химических веществ (при повторном использовании системы) усугубляют данную ситуацию, особенно для патологических больших аггрегатов. Именно поэтому было рекомендовано ICSH не использовать для исследования СОЭ капилляры с диаметром менее 2,5 мм. Этим также может быть объяснена более низкая чувствительность метода Панченкова в патологических пробах по сравнению с методом Вестергрена.

 

Высокий гематокрит на этой стадии и повышенная температура будут способствовать усилению этих процессов. Именно поэтому и производится существенное разведение пробы крови цитратом натрия 1:4 и не рекомендуется проводить исследование СОЭ при температуре выше 20^оС.

 

III. Фаза концентрации и упаковки эритроцитов на дне сосуда (при разном числе эритроцитов в пробе эта стадия начинается с 30 до 40 мин от начала теста). Скорость оседания на этой стадии существенно замедляется.

На этой стадии опять увеличивается влияние свойств эритроцитов на результаты теста. Нормальные эритроциты обладают выраженным отрицательным зарядом поверхности и свойством отталкиваться друг от друга, особенно боковыми частями тора ( 8). Они также обладают упругими свойствами при взаимодействии клеток. Поэтому существует некоторый предел "упаковки эритроцитов" для данной пробы крови, после которого процесс оседания клеток может даже остановиться.

 

Кроме патологических изменений, связанных с состоянием пациента на свойство упаковки эритроцитов будут влиять также некоторые отрицательные преаналитические факторы:

-факторы деструкции и деградации клеток будут увеличивать возможности упаковки клеток и более высокую скорость оседания на этой стадии.

-хранение проб при низких температурах длительное время увеличивает возможность упаковки эритроцитов.

-снижение заряда клеток вследствие действия солей ЭДТУК также усиливает этот процесс.

 

Участок кривой при более плотной упаковке патологически измененных эритроцитов будет более крутым, чем в случае нормальных эритроцитов.

Вывод: В случае измерения СОЭ имеется очень сложная аналитическая система и трудно детально оценить механизмы влияния разных факторов на результат. Поэтому обязательным условием правильного диагностического применения данного теста является строгая стандартизация преаналитических и аналитических условий и их соответствие международной практике.