ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
1. Подсчет количества лейкоцитов(входит в состав общего клинического анализа крови, а также «укороченного» анализа – содержание гемоглобина, число лейкоцитов, СОЭ).
Цель опыта: Освоить методику подсчета общего количества лейкоцитов в крови.
Принцип: подсчет лейкоцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови (или 1 л), исходя из объема единицы счетного поля и разведения крови.
Ход работы: разводят исследуемую кровь в 20 раз 3% уксусной кислотой, подкрашенной геницианвиолетом. Для этого в меланжер до метки 0,5 набирают кровь из пальца, а затем до метки 11 – раствор уксусной кислоты. Кислота разрушает оболочки эритроцитов, а краска окрашивает ядра белых клеток. При этом эритроциты становятся невидимыми и не мешают подсчету лейкоцитов. Размешивают и оставляют на 10 минут. (Допускается счет лейкоцитов не более чем через 2–4 часа после взятия крови).
Подготавливают счетную камеру с сеткой и покровное стекло, затем притирают стекло к камере, слегка надавливая его таким образом, чтобы по краям стекла появились радужные кольца или полосы. Это свидетельствует о высоте счетного поля камеры – 0,1 мм.
Размешивают, удаляют первую каплю, заполняют камеру и оставляют в горизонтальном положении на I мин. для оседания лейкоцитов. Подсчет лейкоцитов ведется в 25 больших квадратах, что составляет 400 маленьких.
Лейкоциты удобнее считать при малом увеличении.
Формула для вычисления количества лейкоцитов в 1мклкрови.
,
где Х – искомое число лейкоцитов в 1 мкл крови;
В – число лейкоцитов в 25 больших квадратах
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ:
1. Роль лейкоцитов в поддержании целостности и проницаемости клеточных мембран.
2. Роль лейкоцитов в гемостазе.
3. Миграция лейкоцитов.