Обсуждение и Примечание 1.

Митохондриальный ДНК-анализ является информативным методом для подтверждения доказательств, полученных на основе других генетических, антропологических или криминалистических исторических анализов. Для достижения высоко-достоверной позитивной идентификации для индивидуального образца только на основе генетического анализа ДНК необходимо использование более информативных маркеров ядерной ДНК, широко применяемых в судебно-медицинской практике. Такие маркеры ДНК разработаны, и образцы соответствующих родственников доступны для анализа.

Примечание 1.

Для высоко-достоверной индивидуальнойДНК- идентификации конкретного скелета или скелетного образца из данного захоронения (в частности, останков скелета N 4), с вероятностью случайного неродственного совпадения сравниваемых участков ДНК у двух сравниваемых индивидов менее чем 1: 100 млн , необходимо проведение дополнительного генетического анализа ДНК.

Для этого следует:

1) провести статистический анализ встречаемости обнаруженных типов мт ДНК (из скелетных останков) в разных этнических группах и популяциях, включая русские, немецкие, датские и др.;

 

2) провести более широко анализ и сравнение участков хромосомной ядерной ДНК скелета N 4 (предполагаемые останки Николая II-го) и его племянника Тихона Николаевича Куликовского-Романова;

 

3) провести анализ участков ядерной ДНК Y-хромосомы (STR-маркеры), наследуемой только по мужской линии; для сравнения могут быть взяты образцы предполагаемых останков Николая II и ныне живущие потомки мужской непрерывной линии Романовых (от Николая I).

 

4) провести ДНК анализобразцов черепов и зубов (предполагаемых останков членов семьи Романовых и Др. Боткина), в случае недостаточности антропологических или иных доказательств.

 

В проведенном ДНК-исследовании:

1. Генотипирование мтДНК осуществлено в полном объеме в короткий период на малом количестве костного материала.

2. Генотипирование костного образца из рассматриваемого захоронения впервые осуществлено в России.

3. Большое количество повторных экспериментов независимыми методами (автоматическое секвенирование, секвенирование с радиоактивным мечением ПЦР-продуктов и секвенирование клонированных фрагментов) исключает какие- либо неясности в «прочтении» нуклеотидных последовательностей.

4. Проведение экспериментального определения нуклеотидных последовательностей мтДНК костного образца (№ 4-46) и сравниваемого «контрольного» образца родственника (Т.Н.К.-Р.) в разных лабораториях и странах и в разное время гарантировало отсутствие «загрязнения» образцов ДНК.

5. Впервые проведено сравнение мтДНК из костного образца с ДНК ближайшего родственника Николая II Романова (племянника).

6. Впервые показано полное совпадение основных форм (HV1 16169C) мтДНК предполагаемых останков Николая II и родственника по материнской линии.

7. Показано совпадение мтДНК данного образца и мтДНК крови Т.Н.К-Р., что соответствует проведенному ранее генетическому анализу (другими авторами) с использованием другого фрагмента берцовой кости скелета № 42 и образцов крови других родственников.

 

Выводы

 

1. Выделены и определены последовательности нуклеотидов (н.) двух наиболее информативных фрагментов митохондриальной (мт) ДНК длиной 400 н. (HV1 участок) и длиной 440 н. (HV2 участок) из :

 

образца крови Т.Н. Куликовского-Романова (К-Р, племянника Николая II Романова)

образца костной ткани левой бедренной кости под # 4-46.

2. Сравнительный анализ показал полное совпадение основных типов (включающих 16169C) последовательностей мтДНК HV1 и HV2 образца Т.Н. Куликовского-Романова и образца 4-46.

 

Вероятность того, что последовательности митохондриальной ДНК данного типа принадлежат близким родственникам по женской (материнской) линии, может быть оценена (оценка с использованием общих популяционных данных) как по крайней мере в 100 раз выше вероятности того, что данные последовательности принадлежат неродственным индивидам.

 

Выявлено также существование дополнительного и менее распространенного типа (16169T) в образце 4-46 (участок вероятной мутации и гетероплазмии, наследуемой по материнской линии Императрицы Марии Федоровны).

 

3. Таким образом, полученные данные соответствуют представлению о близком родстве по женской (материнской) линии Т.Н. Куликовского-Романова и индивида, чей костный образец 4-46 был проанализирован в данном исследовании.

 

Данные не противоречат предположению, выдвинутому на основе обстоятельств дела (вне данного экспертного рассмотрения), о принадлежности костного образца бедренной кости 4-46 российскому императору Николаю II Романову.

 

ГА РФ, ф. 10130, оп. 1, д. 10, л. 171 – 190