Определение глюкозы в крови глюкозооксидазным методом

1. Для определения глюкозы в крови глюкозооксидазным методом готовят опытную и холостую пробы в соответствии с приведенной ниже таблицей:

Отмерить (мл)	Опытная проба (мл)	Холостая проба (мл)
Сыворотка крови	0,05	–
Дистиллированная вода	–	0,05
ТХУ (3% раствор)	0,5	0,5

 

2. Полученные смеси встряхивают и центрифугируют при 8000g в течение 5 мин.

3. Далее с пробами работают в соответствии со следующей таблицей: из холостой и опытной пробирки отбирают по 0,2 мл надосадочной жидкости и смешивают с 2,0 мл рабочего реагента, который содержит глюкозооксидазу.

 

Отмерить (мл)	Опытная проба (мл)	Холостая проба (мл)
Надосадочная жидкость	0,2	0,2
Рабочий реагент	2,0	2,0

 

4. Затем опытную пробу инкубируют в течение 15 мин. при 37°С.

5. Оптическую плотность в опытной пробе измеряют при 520 нм против холостой пробы.

6. Концентрацию глюкозы (в ммоль/л) в сыворотке крови определяют с помощью калибровочного графика.

Для построения калибровочного графика в две пробирки вместо 0,05 мл сыворотки крови вносят по 0,05 мл стандартных растворов глюкозы с концентрациями 5,55 ммоль/л и 16,67 ммоль/л, соответственно.