Вопрос 5 Нуклеопротеины, химическое строение ДНК, РНК, биологическая роль

 

Нуклеопротеины. Схема гидролиза нуклеопротеинов.

Нуклеопротеины - сложные белки, которые в качестве простетической группы имеют ДНК или РНК.

Схему гидролиза нуклеопротеинов можно представить следующим образом:

Нуклеопротеины

Белок ДНК, РНК

(гистоны)

 

полипептиды полинуклеотиды

аминокислоты мононуклеотиды

нуклеозид Н₃РО₄

пуриновые и пентоза

пиримидиновые (рибоза или

основания дезоксирибоза)

 

Нуклеиновые кислоты, биологическая роль.

Нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК) относятся к сложным высокомолекулярным соединениям, состоят из небольшого числа индивидуальных химических компонентов более простого строения. С нуклеопротеинами и, соответственно, нуклеиновыми кислотами непосредственно связаны, кроме того, такие биологические процессы, как митоз, мейоз, эмбриональный и злокачественный рост и др. Нуклеиновые кислоты выполняют ряд важных биологических функ-ций, не свойственных другим полимерным веществам. В частности, они обеспечивают хранение и передачу наследст-венной информации и принимают непосредственное участие в механизмах реализации этой информации путем программирования синтеза всех клеточных белков. Структурные компоненты нуклеиновых кислот выполняют, кроме того, функции кофакторов (коэнзим А и др.), аллостерических эффекторов, входят в состав коферментов (никотин-амидадениндинуклеотид, флавинадениндинуклеотид и др.), принимая тем самым непосредственное участие в обмене веществ, а также в аккумулировании (накоплении), переносе и трасформации энергии. Они являются предшествен-никами вторичных посредников (мессенджеров) – циклических мононуклеотидов (цАМФ и цГМФ), выполняющих

важную функцию в передаче внутриклеточных сигналов.

 

Химическое строение нуклеотидов.

Структурными единицами нуклеиновых кислот являются мономерные молекулы – мононуклеотиды. Следовательно, нуклеиновые кислоты представляют собой полинуклеотиды. Это продукты полимеризации мононуклеотидов, число и последовательность расположения которых в цепях ДНК и РНК определяются в строгом соответствии с программой,

заложенной в молекуле матрицы. Каждый нуклеотид содержит 3 химически различных компонента: гетероциклическое азотистое основание, моносахарид (пентозу) и остаток фосфорной кислоты. В состав нуклеиновых кислот входят азотистые основания двух типов: пуриновые – аденин (А), гуанин (G) и пиримидиновые – цитозин (С), тимин (Т) и урацил (U). В этой «триаде» мононуклеотида углевод занимает

среднее положение. В молекулы ДНК входят A, T, G, C, в РНК- A, C, G, U.

Номенклатура нуклеотидов.

 

Методы, применяемые при изучении строения нуклеопротеинов.

При изучении химического состава и строения нуклеиновых кислот перед исследователем всегда стоит задача выделения их из биологических объектов.

Для выделения нуклеиновых кислот из комплексов с белками необходимо прежде всего разрушить сильные многочисленные электростатические связи - между "+" заряженной молекулой белков и "-" заряженных молекулами нуклеиновых кислот . Для этого гомогенизированный материал обрабатывают 10% NaCl с последующим осаждением нуклеиновых кислот этанолом. В настоящее время для выделения нуклеиновых кислот в нативном состоянии пользуются фенольным методом, основанным на обработке нейтрально - забуференного раствора. Затем смесь подвергают центрифугированию, при этом денатурированный белок попадает в фенольную фазу, а нуклеиновые кислоты остаются в водной среде, из которой их осаждают на холоду добавлением 2-3-х объёмов этанола. Этим методом удается получить достаточно очищенные препараты нуклеиновых кислот (НК).

В настоящее время применяют ряд усовершенствованных методов разделения НК на фракции из суммарного препарата, полученного описанным выше методом. В их числе хроматография на геле фосфата кальция, ионообменная хроматография (в качестве адсорбентов применяют ДЭАЭ - целлюлозу, ДЭАЭ - сефадекс и др.), ультрацентрифугирование, хроматография по сродству на белковых носителях, метод распределения в двухфазных полимерных системах по Альбертсону, а также ферментативные чисто химические методы гидролиза.