Метод гибридизации in situ.

Метод включает:

1) замораживание органа и приготовление криостатных срезов;

2) фиксацию параформальдегидом;

3) выявление мРНК с помощью меченой кДНК. В некоторых случаях цитокиновую мРНК определяют на срезах с помощью радиоизотопной ПЦР.

Иммунофлюоресценция.

Метод включает:

1) замораживание органа и приготовление криостатных срезов;

2) фиксацию;

3) обработку срезов меченными флюоресцеином антицитокиновыми антителами;

4) изуальное наблюдение флюоресценции.

Эти методики (гибридизация in situ и иммунофлюоресценция) быстры и не зависят от пороговых концентраций секретируемого продукта. Однако они не определяют количество секретированного цитокина и могут быть сложны технически. Необходим разнообразный тщательный контроль на неспецифические реакции [3].

С помощью представленных методов оценки цитокинов были выявлены патологические процессы, связанные с нарушениями в системе цитокинов на различных уровнях.

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

Оценка системы цитокинов и их рецепторов чрезвычайно важна для характеристики состояния иммунной системы организма. Изучение различных уровней системы цитокинов позволяет получить информацию о функциональной активности разных типов иммунокомпетентных клеток, о тяжести воспалительного процесса, о его переходе на системный уровень и о прогнозе заболевания.

 

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1 Белохвостикова Т. С. Коррекция вторичных нарушений иммунной системы при хроническом посттравматическом остеомиелите // Медицинская иммунология. 2002,С. 228-229.

2 Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. М.: Медицина, 1994, 485-487 с.

3 Демьянов А. В., Котов А. Ю., Симбирцев А. С. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Цитокины и воспаление. 2003. Т. 2. № 3. С. 20-35.

4 Дранник Г. Н. Клиническая иммунология и аллергология. МИА. М. 2003г. 98-109 с.

5 Завьялов В. П. Структурно-функциональная классификация и эволюция цитокинов // Вестник РАМН. 1993. №2. С. 8 - 10.

6 Кашкин К. П. Цитокины иммуной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. №11. С. 21 - 32.

7 Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефициты: клиника, диагностика, лечение // Иммунология. 1999. №2. С. 14-17.