Материалы и оборудование

Весы лабораторные аналитические; качалка термостатируемая микробиологическая; сушильный шкаф; водяная баня; рН-метр; спектрофотометр; секундомер; колба коническая (250 см³); стакан химический (50, 100, 250 и 500 см³); пипетка (0,2; 1; 2; 5 и 10 см³); бюретка вместимостью 25 см³; цилиндр (100 и 250 см³); спиртовка; чашки фарфоровые выпаривательные вместимостью 150-200 см³; стеклянные палочки; 1%-ный водный раствор казеина; тирозин (триптофан) кристаллический; KNO₃ кристаллический; (NH₄)₂HPO₄ кристаллический; водный раствор Na₂SО₃ (63 г/дм³); CuSO₄ х 5H₂O кристаллический; 0,1 н водный раствор Na₂S₂O₃; 0,1 н водный раствор I₂; 0,1 н водный раствор HСl; 13,6%-ный раствор хлористоводородной кислоты (18,4 см³ 37%-ного раствора HСl); реактив А (2%-ный раствор Na₂CO₃ в 0,1 М водном растворе NaOH); реактив В (0,5%-ный раствор CuSO₄ в 1%-ном водном растворе виннокислого калия или натрия); реактив С (смешивают 49 см³ реактива А с 1 см³ реактива В); реактив Фолина; реактив Несслера; раствор сегнетовой соли (60 г соли растворяют в 100 см³ дистиллированной воды и приливают 5 см³ реактива Несслера); (NH₄)₂SO₄ кристаллический; КH₂РO₄ кристаллический; 5%-ный раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ); 5%-ный раствор NaOH; 0,4%-ный раствор аскорбиновой кислоты; KH₂PO₄ кристаллический; раствор молибденовокислого аммония (25 г (NH₄)₂Mo₇O₂₄·4H₂O растворяют в 600 см³ дистиллированной воды, добавляют 337 см³ конц. серной кислоты и после охлаждения доводят объём раствора дистиллированной водой до 1 дм³ ); основной раствор хлористого олова (1,95 г SnCl₂ ·2H₂O растворяют в 50 см³ 13,6%-ного раствора хлористоводородной кислоты и хранят в склянке, покрытой изнутри слоем парафина); раствор фенолдисульфоновой кислоты (растворяют 25 г фенола в 150 см³ конц. Н₂SO₄ при нагревании в течение 6 ч на водяной бане в колбе с обратным холодильником); водный раствор Ag₂SO₄ (4,4 г в 1 дм³ дистиллированной воды); 25%-ный водный раствор аммиака; 1%-ный спиртовый раствор фенолфталеина; фильтры обеззоленные (синяя лента); вода дистиллированная.

Среда №1 для поддержания культуры гриба Asp. niger (г/дм³): сахароза – 10,0; KNO₃ – 1,0; KH₂PO₄ – 0,5; MgSO₄ – 0,5; NaCl – 0,5 CaCO₃ – 5,0, агар-агар – 20,0; вода водопроводная. рН среды – 5,5-6,0.

Среда №2 для культивирования гриба (г/дм³): сахароза – 7,2; глюкоза – 3,6; KH₂PO₄ – 13,7; MgSO₄ – 1,2; вода водопроводная. рН среды – 6,9-7,2.

Среда №3 для поддержания культуры B. subtilis (на основе сухого питательного агара) (г/дм³): панкреатический гидролизат рыбной муки – 24,0; натрий хлористый – 4,0; агар микробиологический – 12,0. рН среды – 6,9-7,2.

Культивирование клеток B. subtilis проводят на среде №4 следующего состава (г/дм³): крахмал – 20,0; KCl – 1,5; MgSO₄ – 5,0; CaCl – 0,1; бобовый экстракт – 10,0. рН среды – 6,9-7,2.

В качестве источника азота в составе сред для культивирования используют KNO₃; NH₄NO₃; (NH₄)₂SO₄ или (NH₄)₂HPO₄ в количестве 2%.

Все среды стерилизуют автоклавированием в течение 15-20мин при 1 атм.