Ксантопротеиновая реакция.
Принцип метода: ароматические аминокислоты свободные, а также входящие в состав пептидов и белков при нагревании с азотной кислотой образуют нитросоединение желтого цвета, переходящего в оранжевый при добавлении щелочи.
Материальное обеспечение: пробирки, пипетки, штатив, растворы белков, концентрированная азотная кислота, 20% раствор едкого натра.
Ход работы:
1. Возьмите 3 прибирки.
В первую налейте 1 мл раствора яичного альбумина.
Во вторую налейте 1 мл раствора пепсина.
В третью налейте 1 мл раствора амилазы.
2. Во все пробирки добавьте по 5 капель концентрированной азотной кислоты.
3. Осторожно нагрейте растворы и наблюдайте окраску.
4. Охладите пробирки, добавьте по 0,5 мл 20% раствора NаОН и наблюдайте изменение окраски.
При наличии ароматических аминокислот появляется желтое окрашивание, которое после охлаждения раствора и добавления раствора едкого натра переходит в оранжевое.
Полученные результаты занесите в таблицу.
Результаты реакций:
№ пробирки | Исследуемый р-р | Окраска растворов в реакциях | ||
биуретовой | нингидриновой | ксантопротеиновой | ||
Яичный белок | ||||
Пепсин | ||||
амилаза |
ВЫВОДЫ:
Подпись преподавателя:
Приложение 1