Устройство светового микроскопа

В микробиологической практике применяют световые микроскопы отечественных марок: МБР-1, МБИ-1, МБИ-2, МБИ-3, МБИ-6,
Биолам Р-1 и др. Они предназначены для изучения формы, структуры, размеров и других признаков различных микроорганизмов, величина которых не менее 0,2…0,3 мкм.

Световой микроскоп (рисунок 7) состоит из двух частей – оптической и механической.

К механической частиотносятся штатив, предметный столик, тубус.

Штатив состоит из основания и неподвижно привинченного тубусодержателя. К штативу примыкает коробка механизмов, система зубчатых колес для регуляции движения тубуса. Система приводится в действие вращением макрометрического и микрометрического винтов, предназначенных соответственно для грубой и точной фокусировки на препарате. При вращении винтов по часовой стрелке тубус движется по направлению к препарату; при вращении против часовой стрелки – от препарата.

Предметный столик служит для размещения на нем препарата с объектом исследования. Предметный столик может перемещаться с помощью винтов в горизонтальной плоскости. В центре столика находится круглое отверстие для освещения препарата снизу лучами света, направляемыми зеркалом микроскопа. На столике смонтированы два зажима (клеммы) – пружинящие металлические пластинки, предназначенные для закрепления препарата.

Тубус (труба) – оправа, в которую заключены элементы оптической системы микроскопа. К нижней части тубуса прикрепляется револьвер (объективодержатель) с гнездами для объективов. В верхний конец тубуса вставляется окуляр. Современные модели микроскопов имеют наклонный тубус с дугообразным тубусодержателем, что обеспечивает горизонтальное положение предметного столика.

Оптическая часть микроскопа состоит из основного оптического узла (объектив и окуляр) и вспомогательной осветительной системы (зеркало и конденсор с ирисовой диафрагмой).

Зеркало имеет две поверхности: плоскую и вогнутую, сложенные тыльными сторонами и заключенные в одну кольцевидную оправу, закрепленную в полукруглой вилке. С ее помощью зеркало перемещается в любом направлении. При естественном освещении и при малых увеличениях употребляется плоское зеркало, при искусственном, как и при естественном, но больших увеличениях, – вогнутое.

Конденсор представляет собой оптическую систему из 2, 3 короткофокусных линз для усиления яркости освещения рассматриваемого объекта. Конденсор концентрирует лучи, идущие от плоского зеркала, и направляет их под большим углом на объект. Линзы конденсора вмонтированы в цилиндрическую оправу, соединяющуюся с зубчатым механизмом, позволяющим перемещать конденсор вверх и вниз вдоль оси микроскопа специальным винтом. При опускании конденсора поле зрения микроскопа затемняется, при поднятии – освещается. Для регулировки интенсивности освещения конденсор снабжен ирисовой (лепестковой) диафрагмой, состоящей из тонких непрозрачных серповидных пластинок. При передвижении рычага диафрагмы, расположенного в нижней части оправы конденсора, пластинки можно сдвигать и раздвигать, плавно меняя диаметр действующего отверстия. У многих современных видов микроскопов конденсор и источник света вмонтированы в микроскоп.

Объективы (от греч. objectum – предмет исследования)являются наиболее важной частью микроскопа, от их качества зависит в основном изображение объекта. Они ввинчиваются в гнезда револьвера и состоят из системы линз, заключенных в металлическую оправу. Передняя, или фронтальная, линза объектива является самой маленькой и единственной, дающей увеличение. Остальные линзы в объективе только исправляют недостатки полученного изображения и называются коррекционными.

Объективы подразделяются на сухие и иммерсионные. При работе с сухими объективами между фронтальной линзой объектива и объектом исследования находится воздух. В случаях использования иммерсионных объективов между фронтальной линзой объектива и объектом исследования должна находиться жидкость с показателем преломления, близким к показателю преломления стекла. Лучшим для этой цели является иммерсионное масло (кедровое) с коэффициентом преломления 1,515 (коэффициент преломления стекла 1,53). Кедровое масло получают из семян виргинского можжевельника Juniperus virginiana L. или зеравшанской арчи Juniperus seravschana Kom. В настоящее время в качестве иммерсионной жидкости чаще применяют синтетические продукты, соответствующие по оптическим свойствам кедровому маслу. Благодаря этому, световые лучи при переходе из стекла в слой кедрового масла не преломляются (так как остаются по существу в оптически однородной гомогенной среде) и, не отражаясь, попадают в объектив. В микроскопах МБР-1 и МБИ-1 два сухих объектива с увеличением ´8, ´40 и один иммерсионный с увеличением ´90. Данные о каждом объективе имеются на его оправе: а) ´8, 40, 90; б) числовая апертура (характеризует светособирательную способность объектива);
в) заводской номер. Наряду с этими обозначениями иммерсионные объективы ´90 имеют дополнительный буквенный индекс ОИ или МИ (объектив иммерсионный или масляная иммерсия), а также черную маркировочную линию в нижней части объектива.

Окуляр (от лат. oculus – глаз) вставляется в верхний конец тубуса. Окуляр представляет собой систему двух плоско-выпуклых линз, обращенных выпуклостью в сторону объектива. Линза, обращенная к глазу, называется глазной, а обращенная к препарату – полевой или собирательной. Назначение полевой линзы - собирать лучи, идущие от объектива таким образом, чтобы они проходили через маленькое отверстие глазной линзы. Глазная линза, подобно простой лупе, увеличивает действительное изображение, даваемое объективом. Расстояние между линзами равно полусумме их фокусного расстояния.

Назначение окуляра состоит в прямом мнимом увеличении того действительного обратного и увеличенного изображения, которое дает объектив. Окуляры помечаются цифрами, показывающими их собственное увеличение ´5, ´7, ´10, ´15. При длительной работе с микроскопом следует пользоваться двойными окулярами – бинокулярной насадкой. Бинокулярные насадки часто имеют собственное увеличение (около ´1,5) и снабжены коррекционными линзами. Корпуса насадки могут раздвигаться в пределах от 55 до 75 мм в зависимости от расстояния между глазами наблюдателя. Работа с бинокулярной насадкой улучшает видимость объекта, снижает яркость изображения и тем самым сохраняет зрение.