Определение комплемента.

Комплемент – это группа сывороточных белков, состоящая из протеаз и их активаторов. Существуют два механизма активации комплемента – классический и альтернативный. Комплемент играет важную роль в защите от микробов, активирует катаболизм циркулирующих иммунных комплексов и участвует в регуляции функций иммунной системы.

В клинической практике невозможно обходиться без определения содержания комплемента и его компонентов в сыворотке крови. Это касается как патологии со сниженной активностью комплемента, так и случаев повышения его активности.

Определение гемолитической активности комплемента. Для исследования компонентов классического пути активации комплемента определяют его гемолитическую активность. Суть метода заключается в следующем:

1) разные разведения сыворотки больного и нормальной сыворотки добавляют к эритроцитам барана, покрытым антителами;

2) степень гемолиза оценивают фотометрически по выходу гемоглобина в раствор. За единицу гемолитической активности комплемента принимают величину, обратную тому разведению сыворотки, при котором разрушаются 50% эритроцитов.

Существуют модификации метода, основанные на применении небольших объемов исследуемой сыворотки. Определение гемолитической активности комплемента по 100% гемолизу основано на гемолизе в геле. Суть этого метода заключается в следующем:

1) в геле, содержащем покрытые антителами эритроциты барана, делают лунки;

2) в лунки вносят разные разведения исследуемой и нормальной сывороток;

3) гемолитическую активность комплемента оценивают по диаметру зон гемолиза.

Определение гемолитической активности комплемента позволяет обнаружить недостаточность компонентов комплемента, прежде всего участвующих в образовании мембраноатакующего комплекса. Кроме того, оценка этого показателя может использоваться для выявления активации комплемента, например при СКВ и гломерулонефрите, хотя чувствительность метода для этого недостаточно высока.

Альтернативный путь активации комплемента исследуют редко.

Определение компонентов комплементаобычно проводят при обследовании больных с аутоиммунными заболеваниями и при подозрении на генетический дефект комплемента.

Количественноеопределение компонентов комплементачаще (С3 и С4) проводят с помощью простой радиальной иммунодиффузии и нефелометрии. Однако если функциональный дефект компонентов комплемента не сопровождается изменением их антигенных свойств, эти методы не информативны.

Функциональные исследованияпозволяют оценить активность отдельных компонентов комплемента в сыворотке. Суть метода заключается в следующем:

1) к стандартной сыворотке, лишенной какого-либо компонента комплемента, добавляют исследуемую сыворотку (источник недостающего компонента комплемента);

2) определяют гемолитическую активность комплемента. Если гемолитическая активность комплемента не восстанавливается до норы, значит, активность этого компонента комплемента в исследуемой сыворотке снижена.

Иногда дополнительно оценивают активность регуляторных компонентов комплемента, например ингибитора Cl-эстеразы.