Простые методы окраски микробов

Простые методы окраски препаратов предполагают использование одного анилинового красителя и позволяют изучить такие морфологические признаки микроорганизма, как форму, размеры, расположение в мазке. Для этих целей используется ряд красителей: метилено­вый синий, фуксин и др.

Окраска спиртово-водным раствором метиленового синего

Приготовление раствора: красителя 1 г, 95% спирта 10 мл, дистиллированной воды 100 мл.

Техника. Нанести на фиксированный мазок на 3-5 минут.

Микроскопическая картина. Все клетки окрашиваются в синий цвет.

Окраска водным раствором метиленового синего

Приготовление раствора: красителя 1 г, дистиллированной воды 1000 мл.

Техника. Нанести на фиксированный мазок на 5-10 минут.

Микроскопическая картина. Окраска дает нежные отчетливые препа­раты клеток, окрашенных в синий цвет.

Окраска щелочным метиленовым синим (синим Леф­флера)

Приготовление щелочного раствора метиленового синего: дистиллированной воды 100 мл, 10% раствора едкого калия 2 капли, насыщенного (7%) раствора метиленового синего 30 мл или 2) метиленового синего 3 г, 95% спирта 20 мл, 1 % раствора едкого калия 1 мл, дистилли­рованной воды 100 мл. Это стойкий и хорошо красящий раствор.

Техника. Нанести на фиксированный мазок на 3-10 минут.

Микроскопическая картина. Дает окраску в синий цвет различной интенсивности для разных видов микроорганизмов и тканевых элементов (рис.13).

Окраска разведенным карболовым фук­сином

Техника. На зафиксированный мазок наносят фуксин Циля, разведенный непосредственно перед окраской, дистилли­рованной водой в соотношении 1:10. Выдерживают 1-2 минуты, после чего смывают водопроводной водой, высушивают и микро­скопируют.

Микроскопическая картина. Все клетки равномерно окра­шиваются в розово-красный цвет.

 

Приготовление и окраска препаратов для люминесцентной микроскопии

Препараты для люминесцентной микроскопии готовят так же, как для световой. Это относится и к их фик­сации. Окраска препаратов отличается тем, что для люми­несцентной микроскопии применяют специальные красители – флуорохромы. Их отличительная особенность – способность све­титься под воздействием ультрафиолетовых и сине-фиолетовых лучей. Среди флуорохромов встречаются самые разнообразные органические вещества. Для окраски микроскопических препаратов применяют очень слабо концентрированные (1:500-1:100000) растворы флуорохромов. Растворы готовят на дистиллированной воде, изотоническом растворе хлорида натрия или буферных смесях и хранят в тем­ной склянке, избегая действия света.