БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ОЦЕНКИ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ И ПРЕПАРАТОВ, СОДЕРЖАЩИХ СЕРДЕЧНЫЕ ГЛИКОЗИДЫ

Биологической оценке подлежат:

1. Листья наперстянки пурпуровой, крупноцветковой и их препараты.

2. Препараты наперстянки шерстистой.

3. Трава, препараты горицвета.

4. Трава, листья, цветки ландыша, препараты ландыша, сложные лекарственные формы, содержащие настойку ландыша.

5. Семена и препараты строфанта.

6. Трава и семя желтушника раскидистого (серого), сложные лекарственные формы, содержащие препараты желтушника серого.

Принцип метода биологической оценки

Биологическая оценка указанных выше средств основана на способности сердечных гликозидов вызывать в токсических дозах систолическую остановку сердца животных.

Активность сердечных средств оценивают по сравнению с активностью стандартных образцов и выражают в единицах действия.

Испытания проводят на лягушках, кошках или голубях. Устанавливают наименьшие дозы стандартного образца и испытуемого препарата, вызывающие систолическую остановку сердца 'Подопытных животных. Затем рассчитывают содержание единиц действия в 1 г исследуемого средства, если испытываются лекар-венные растения или сухие концентраты; в одной таблетке — прииспытании таблеток или в 1 мл, если испытываются жидкие екарственные формы.

Для обнаружения сердечных гликозидов в растительных экстрактах часто используют цветные реакции, которые разделяются на три группы: на стероидное ядро, на лактонное кольцо, на углеводную часть молекулы.

На стероидное ядро

· Реакция Либермана–Бурхарда приводит к образованию сине-зеленого окрашивания при добавлении смеси уксусного ангидрида и кислоты серной (50 частей уксусного ангидрида и 1 часть кислоты серной концентрированной).

· С реактивом Чугаева (хлорид цинка и ацетилхлорид в кислоте уксусной) образуется розовое окрашивание с максимумом поглощения при λ= 562 нм.

· Карденолиды, которые содержат диеновую группу или способны ее образовывать под действием кислоты трихлоруксусной, дают положительную реакцию Розенгейма. При этом (А, = 562 нм) возникает розовая окраска, которая переходит в лиловую или синюю.

· На пятичленное ненасыщенное лактонное кольцо. Проводят реакции с ароматическими нитропроизводными в щелочной среде:

· реакцию Кедде с кислотой 3,5-динитробензойной (фиолетово-красная окраска) – специфическую на у-лактонное кольцо карденолидов;

· реакцию Легаля с натрия нитропруссидом (красная окраска);

· реакцию Раймонда с м – динитробензолом в бензоле (фиолетовая окраска);

· реакцию Балье с кислотой пикриновой.

На дезоксисахара

· Реакция Келлера–Килиани со смесью двух реактивов: кислоты уксусной ледяной, содержащей следы железа (III) сульфата, и кислоты серной концентрированной со следами железа (III) хлорида (васильково-синяя окраска).